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活细胞核染色试剂盒是利用N06探针进行细胞核特异性染色的试剂盒。本试剂盒中的N06活细胞核染色探针为红色荧光标记的活细胞核探针，具有652/680nm的最大激发/发射波长。
当膜通透性的绿色荧光探针N06进入细胞后，选择性的跟DNA结合。染色探针N06在进入细胞膜之前荧光较弱，当与DNA结合后其荧光强度大大增强，被激发后可以发出红色的荧光，具有很高的淬灭常数和激发态寿命。
荧光探针N06除了最简单的细胞核荧光标记外，还可以用于分析活细胞中DNA的含量，用于荧光成像，微孔板分析和流式细胞术。在合适的滤光器下，这种DNA结合染料与其他颜色的荧光染料一起可用于活细胞的多种颜色分析。
以96孔板每孔200μL染色液计，本试剂盒小包装可以染色500～1250个样本。
检测方法：
● 流式细胞仪● 荧光显微镜● 激光共聚焦
样本类型：
● 悬浮细胞● 贴壁细胞

组份	500-1000T	1000-2000T
组份A：N06活细胞核染料	500μL	500μL×2
组份B：染料稀释液	10mL	20mL

染料-20℃避光保存；避免反复冻融；稀释液2～8℃保存。有效期6个月。
注：
● 染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
● 染色液A为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
● 可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。


流式细胞仪或荧光显微镜或激光共聚焦，移液器，离心机，PBS或HBSS（无酚红）、纯水


● 螺旋盖微量管装试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
● N06染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
● 使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
● 细胞处理需要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。
● 标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。
● 染色后立即进行分析。
● 本染色液可用于细胞涂片、细胞的检测。


一、染色工作液的配制：
根据样本数量，用37℃培养箱预热染料稀释液试剂B将N06荧光染料10倍稀释。再用HBSS等缓冲液或相应的无血清培养基将探针N06进行20～50倍稀释，配制成染色工作液。
注：
● 也可不用试剂盒中的试剂B，直接用HBSS等缓冲液或相应的无血清培养基稀释N06染料至所需浓度。
● 开始实验前，使用HBSS等缓冲液或相应的无血清培养基稀释染料储存液到需要的工作浓度。工作浓度应根据不同细胞的预实验结果确定的最佳工作浓度，建议至少在超过10倍范围的浓度下进行测试。一般染色终浓度200～500倍稀释适合大多数细胞样本。
● 建议收到产品后，根据单次使用量，对母液进行小量分装，每次使用一管，试剂-20℃避光冻存，一年稳定。
● 工作液现配现用。
● 为了降低探针加载过度可能引起的假阳性，建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。
● 若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育，荧光信号会衰减。
二、细胞染色
A：悬浮细胞染色
1.用PBS洗涤细胞2次。
2.加入适量体积的染色工作液重悬细胞，使其密度大约为1×106/mL。
3.在37℃避光孵育细胞15～60分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用15分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
注：
● 若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。
B：贴壁细胞原位染色
1.用PBS洗涤细胞2次。
2.细胞培养板中或细胞爬片上加入适量体积的染色工作液。
注：
● 96孔细胞培养板每孔加入100μL染色液即可。
3.37℃孵育细胞15～60分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用15分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
注：
● 若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。
4.吸干染色工作液，用培养液洗培养板或盖玻片2～3次，然后加入培养基。
三、用荧光显微镜或流式细胞仪检测
激发波长为652nm，最大发射波长为680nm。
相关搜索：活细胞核染色试剂盒-红色荧光